前辅文
模块一 目的基因的克隆及序列分析
1-1 RNA 的提取及检测
1-2 RT-PCR 方法扩增目的基因
1-3 cDNA 末端快速扩增法(RACE)合成目的基因
1-4 目的基因的克隆
1-5 目的基因的序列测定及初步分析
1-6 cDNA 文库的构建及目的基因的筛选
1-7 mRNA 差别显示克隆差异表达基因
1-8 电子克隆法获得目的基因
1-9 化学合成法获得目的基因
模块二 核酸分子杂交
2-1 Southern 杂交
2-2 Northern 杂交
2-3 原位杂交
2-4 原位RT-PCR
模块三 大规模基因差异表达分析
3-1 基因芯片分析
3-2 基于第二代高通量测序技术的转录组测序分析
3-3 差异表达基因功能富集分析
3-4 实时荧光定量PCR 检测基因表达
模块四 单核苷酸多态性的检测
4-1 衍生酶切扩增多态性序列法
4-2 Taqman 荧光探针法
4-3 高分辨率熔解曲线法
4-4 定向诱导基因组局部突变技术
模块五 目的基因的遗传转化
5-1 PCR 法克隆目的基因全长
5-2 Gateway 技术构建表达载体
5-3 农杆菌真空渗入法遗传转化
5-4 水稻愈伤组织的遗传转化
5-5 RNAi 发夹式载体构建及转化
5-6 CRISPR/Cas9 技术构建表达载体
5-7 大规模突变体库的构建
模块六 蛋白质样品的制备、分离与鉴定
6-1 蛋白质样品的制备
6-2 蛋白质的定量
6-3 SDS- 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质
6-4 双向电泳分离蛋白质
6-5 荧光标记差异分析凝胶电泳法分析差异表达蛋白质
6-6 蛋白质样品的质谱鉴定
模块七 目的蛋白质表达、纯化与检测
7-1 目的基因原核表达质粒的构建
7-2 谷胱甘肽S- 转移酶(GST)融合蛋白的表达与纯化
7-3 组氨酸标签融合蛋白的表达与纯化
7-4 麦芽糖结合蛋白(MBP)融合蛋白的表达与纯化
7-5 免疫印迹检测目的蛋白质的表达
模块八 蛋白质相互作用的研究
8-1 经典酵母双杂交
8-2 Pull-down 分析蛋白质相互作用
8-3 蛋白质亚细胞共定位
8-4 免疫共沉淀
*8-5 T7 噬菌体展示筛选技术
*8-6 细胞质酵母双杂交系统
模块九 激光扫描共聚焦显微镜的应用
9-1 激光扫描共聚焦显微镜的基本使用
9-2 花粉管内钙离子梯度分布的观察
9-3 动物细胞微丝微管细胞核共定位观察
9-4 激光扫描共聚焦显微镜检测荧光蛋白
模块十 生物信息学软件与数据库应用
10-1 常用分子生物学数据库检索
10-2 常用分子生物学软件使用
10-3 蛋白质结构及其相互作用预测
附录